原代細胞培養

《Cell Stem Cell》

Efficient expansion and CRISPR-Cas9-mediated gene correction of patient-derived hepatocytes for treatment of inherited liver diseases

研究內容：

在實體器官，特別是肝臟中進行基于細胞的體外基因治療，在技術上具有挑戰性。科研人員報告了肝細胞治療臨床應用的可行策略。先通過大規模擴增患者源性肝細胞獲得了高質量的自體肝細胞。此外，增殖的患者源性肝細胞與通過篩選鑒定的AAV2.7m8變體一起，有效地實現了crispr - cas9介導的靶向整合，實現了FAH或OTC致病性突變的功能糾正。重要的是，這些經過編輯的肝細胞以高水平重新填充受傷小鼠的肝臟并經歷成熟，成功地治療了移植后酪氨酸血癥小鼠。該研究結合了患者來源的可移植肝細胞的體外大規模細胞擴增和基因編輯，具有治療人類肝臟疾病的潛力。

其中，對分離得到的原代人肝細胞的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。

其他組織細胞

《Cell Stem Cell》

Preclinical efficacy and safety of encapsulated proliferating human hepatocyte organoids in treating liver failure

研究內容：

藻酸鹽包封肝細胞移植是治療肝衰竭的一種很有前途的策略。然而，由于缺乏原代人肝細胞和難以控制其質量，其臨床應用受到阻礙。該科研小組之前報道了增殖的人肝細胞(ProliHHs)。該項研究中，質量控制的ProliHHs被大量生產，并被改造成肝類器官，以提高它們的成熟度。將包封的ProliHHs肝類器官(eLO)腹腔內移植治療肝衰竭動物。值得注意的是，eLO治療增加了肝切除術后肝衰竭(PHLF)小鼠的存活率，并通過提供肝功能改善高氨血癥和低血糖。此外，eLO治療可以保護腸道免受phlf增強的滲透性，并使血清內毒素和炎癥反應正常化，從而促進肝臟再生。eLO對對乙酰氨基酚所致肝衰竭的治療效果得到進一步證實。此外，科研人員進行了毒性和生物分布評估，證明eLO對動物沒有不良影響，并且仍然是非致瘤性的。

其中，小鼠皮下結締組織細胞：L-Wnt3a細胞系的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。

《Heliyon》

Quantitative proteomics assay reveals G protein-coupled receptor kinase 4-induced HepG2 cell growth inhibition

研究內容：

為了探討G蛋白偶聯受體激酶4 (GRK4)對HepG2細胞的生物學作用及其可能的生物學機制，科研人員用過表達grk4的慢病毒載體(OE)，和陰性對照慢病毒載體(NC)感染HepG2細胞，使用細胞計數試劑盒-8和流式細胞術(FCM)評估細胞增殖、周期和凋亡。利用定量蛋白質組學技術分析比較OE細胞和NC細胞的蛋白譜和差異表達蛋白(DEPs)，并利用生物信息學分析和平行反應監測(PRM)技術研究其功能、表達和可能的機制。結果顯示：接受OE的HepG2細胞比接受NC的HepG2細胞生長更慢。流式細胞儀顯示，與NC細胞相比，OE細胞發生了s期周期阻滯，OE細胞和NC細胞均未發生凋亡。在定量蛋白質組學鑒定的7006個蛋白中，根據過濾參數檢測了403個DEPs，其中135個表達下調，268個表達上調。除了參與過氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR)信號通路外，DEPs還參與細胞增殖、周期和代謝的生物學過程。PRM驗證了與PPAR通路相關的DEPs的表達。本研究表明，GRK4可阻止HepG2細胞增殖，使細胞周期阻滯在s期，而PPAR通路通過GRK4參與HepG2細胞的調控。

其中，人胚腎細胞HEK293T和肝癌細胞HepG2的體外培養實驗，用到了Ausbian血清系列產品。

《Inflammation》

Specific Knockdown of the NDUFS4 Gene Reveals Important Roles of Ferroptosis in UVB-induced Photoaging

研究內容：

紫外線(UV)照射顯著地促進光老化。研究發現的鐵依賴性細胞死亡模式鐵凋亡在UVB誘導的皮膚光老化中起關鍵作用。本研究探討了鐵下垂在這方面的功能和調節機制。以細胞內鐵和活性氧(ROS)增加為特征，鐵下垂與線粒體功能和結構有關。通過RNA測序，科研人員確定了與UVB介導的光老化有關的NADH:泛醌氧化還原酶亞基S4 (NDUFS4)基因，并通過敲低NDUFS4來探索其在鐵死亡中的作用。在體外，抑制NDUFS4可降低鐵下垂，降低ROS和基質金屬肽酶1水平，增加I型膠原α 1鏈、谷胱甘肽過氧化物酶4 (GPX4)、鐵蛋白重鏈1和溶質載體家族7成員11水平，提示鐵下垂保護機制增強。此外，NDUFS4通過絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)途徑調控鐵下垂，其敲低可降低p38和ERK磷酸化，提高GPX4水平，增強鐵下垂抗性。動物實驗支持這些發現，表明Ferrostatin-1，一種鐵下垂抑制劑，顯著減輕uvb誘導的皮膚光老化和相關蛋白的表達。這項研究揭示了NDUFS4在調控鐵凋亡中的新作用，并為鐵凋亡介導的uvb誘導的皮膚光老化提供了新的見解。

其中，對人皮膚成纖維細胞BJ Cell的體外培養，用到了Ausbian胎牛血清。